一种改进的鸡蛋清提取溶菌酶催化剂配方及工艺步骤

溶菌酶又称胞壁质酶或N-乙酰胞壁质聚糖蛋白水解酶，色白、鸡蛋清中含量最为丰富，其分子量为14388，结晶形状随结晶条件而异，是由129个安基酶组成的，碱性球蛋白，一种罕见的极其稳定的蛋白质。溶菌酶的最适合PH值为6.6，等电点为4.60，溶菌酶是一种国内外很紧俏的生化物质，广泛用于医药、化工、食品等行业，在医药上，溶菌酶可水解细菌细胞壁，所以具有抗炎作用并保护机体不受感染，在化工上可作多种生产原料的中间体应用，在食品上可在用于抗腐保鲜，尤其重要的是近年来溶菌酶已成为基因工程及细胞工程必不可少的工具酶，随着生物工程的发展提取溶菌酶具有重要的战略意义。现有的用鸡蛋提取溶菌的工艺如下：1、取新鲜或冷冻蛋清，除去杂质(冷冻蛋清让其自然融化)，将处理过的蛋清移入搪瓷桶里，在搅拌条件下按15％加入已处理好的724型离子交换树脂，使树脂全部悬浮在蛋清中，于5-15℃搅拌吸附6小时，阴凉处静置过夜，待分层后弃去上清液，下层沉淀用树脂反复冲洗几次，除去蛋白，最后滤干树脂，移入另一搪瓷桶。2、洗脱：在树脂中加入等体积PH值6.5，0.15摩尔/升磷盐缓冲液，搅拌20分钟，弃去缓冲液，按同法再处理一次，最后将除去杂物的树脂加入1倍量浓度为10％的硫酸铵溶液，搅拌洗脱1小时，滤出并收集洗脱液，按上法再收集一次合并二次洗脱液放入沉淀缸中。3、沉淀：在沉淀缸中按洗脱液体积分别加入32％的固体硫酸铵粉未，充分搅拌使其完全溶解，此时，白色沉腚产生，在冷处放置过夜，虹吸上清液，收集沉淀。4、透析：将沉淀用适量蒸馏水全部溶解，然后装入透析袋中，在冷水透析过夜，以除去小分子硫酸铵，收集透所液。5、盐析、干燥：将透析过夜收集在搪瓷桶中用1∶5的盐酸(即1份盐酸加5份水)调PH3.5，加入5％的氯化钠，搅均，冷处放置48小时左右，收集溶菌酶盐析物，干燥：将沉淀的盐析物倒入丙酮中，搅拌放置2小时，滤去丙酮(可回收)沉淀物干燥即得溶菌酶产品。该工艺的第三步使用硫酸铵来沉淀溶菌酶，溶菌酶的沉淀速度很慢且存在沉淀不完的问题，从而影响溶菌酶的活性和产量。

华炬科技新产品研究所技术咨询委员会科研人员现推荐一项一种改进的鸡蛋清提取溶菌酶催化剂配方及工艺步骤，该技术的关键是在第三步沉淀工艺中加入催化剂使其和硫酸铵一起参与溶菌酶的沉淀，这样就可解决多年来人们单纯使用硫酸铵沉淀溶菌酶沉淀慢及沉淀不完全的问题，现将该一种改进的鸡蛋清提取溶菌酶催化剂配方及工艺步骤及技术方案及实施例介绍如下供研究交流参考：（311311  318552）